小鼠抵抗素基因及其反义核酸真核表达体系的构建与鉴定

• 作 者: 李芳萍 李志臻 傅玉如 严励 傅祖植
• 机 构: 中山大学附属第二医院内分泌科
• 出 处: 临床医学工程
• 发表日期: 2009年3期
• 关键词: 抵抗素 基因 真核表达质粒 resistin gene eukaryotic expression plasmid

目的构建载有小鼠抵抗素（resistin）基因及其反义核酸的重组真核表达质粒，为下一步进行resistin生物功能研究打基础。方法用resistin基因mRNA编码区序列特异引物，从小鼠脂肪组织中．通过RT—PCR的方法合成resistin cDNA，T4DNA连接酶将resistin cDNA克隆于pGEM-T载体，经双酶切及测序鉴定克隆成功后再亚克隆于pcDNA3．1^（＋）或pcDNA3．1^（-）真核表达载体，并测序鉴定。结果PCR产物长度与resistin cDNA理论长度363 bp相符；重组