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目的:构建真核表达载体pBBS212-AFP/HSP70,进行肝癌基因工程疫苗主动免疫的初步研究.方法:构建的真核表达载体pBBS212-AFP/HSP70,磷酸钙共沉淀法转染SP2/0细胞,放射免疫和双夹心ELISA法鉴定AFP和AFP/HSP70融合蛋白的表达.以上构建真核载体进行BALB/C小鼠股四头肌注射,免疫3次后,取脾制备悬液,经PHA和AFP刺激后,与HepG2细胞混合培养,MTT检测细胞毒反应.结果:构建的pBBS212-AFP/HSP70真核载体经磷酸钙共沉淀法转染,建立了分泌表达AFP/HSP70融合蛋白的SP2/0细胞株.上真核载体免疫小鼠后脾细胞与肝癌细胞混合培养,MTT检测显示对AFP表达较高的HepG2细胞呈现明确的杀伤效应,而空载体免疫组混合细胞培养表现较弱的效应.结论:pBBS212-AFP/HSP70真核载体的构建及其抗人肝癌细胞的体外细胞毒实验初步显示pBBS212-AFP/HSP70作为基因工程疫苗具有一定的意义,为今后深入实验研究奠定了良好的基础.