丁酸梭菌1，3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作 者: 杨登峰 韦宇拓 黄日波
• 机 构: 广西科学院工业生物技术中心,广西大学生命科学与技术学院
• 出 处: 生物加工过程
• 发表日期: 2008年1期
• 关键词: 克隆 丁酸梭菌 表达 氧化还原酶 1 3-丙二醇 cloning Clostridium butyricum expression oxidoreduct
• 基金项目: 国家863计划课题资助项目（2003AA001039）

以丁酸梭菌（Clostridium butyricum）基因组DNA为模板，利用PCR技术扩增得到1，3-丙二醇氧化还原酶基因dhaT，将它连接到pMD18一T载体上，得到重组质粒pMD—dhaT，对此重组质粒进行序列测定，对其DNA序列分析表明，dhaT基因全长为1 158bp。将dhaT基因插入表达载体pSE-380中，构建成重组子pSE—dhaT，并在大肠杆菌JMl09中进行诱导表达。研究表明，以1，3-丙二醇为底物时，基因工程菌在37℃下，以1．0mmol／L IPTG诱导14h，酶活力达到16．