【摘 要】
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目的 研究生长停滞特异性基因6(growth arrest-specific gene 6,gas6)在成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)辐射损伤后凋亡及增殖中的作用.方法 体外建立MC3T3-E1细胞辐照损伤模型,
【机 构】
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天津医科大学口腔医院牙周科,天津,300070;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所实验血液学与生物化学研究室,北京100850;华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学研究中心,广州510005;军
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目的 研究生长停滞特异性基因6(growth arrest-specific gene 6,gas6)在成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)辐射损伤后凋亡及增殖中的作用.方法 体外建立MC3T3-E1细胞辐照损伤模型,通过流式细胞术检测辐照对该细胞凋亡和增殖的影响;通过qRT-PCR和ELISA方法检测该细胞在辐照后gas6基因表达及蛋白分泌变化;使用gas6小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对MC3T3-E1辐照损伤模型进行处理,通过BrdU掺入实验结合流式细胞术分析其对该细胞增殖的影响;使用AXL抑制剂R428对其辐照损伤模型进行处理,通过BrdU掺入实验检测GAS6作用受体阻断后对该细胞增殖的影响,以探究潜在的分子机制.结果 成功建立MC3T3-E1辐照损伤模型,流式分析结果表明,9Gyγ射线照射能引起MC3T3-E1的凋亡;qRT-PCR以及ELISA实验结果显示,9Gyγ射线照射导致其gas6基因表达及蛋白分泌显著增加;流式分析结果表明,gas6的沉默表达会显著抑制辐照损伤的MC3T3-E1的增殖,AXL受体抑制剂R428能显著抑制辐射损伤MC3T3-E1的增殖,提示GAS6/AXL轴在MC3T3-E1辐射损伤再生中发挥正性调控作用.结论 GAS6具有促进MC3T3-E1辐射损伤后再生的作用.
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