【摘 要】
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采用RDP试剂提取日本对虾精巢和卵巢的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.根据SMART(switching mechanism at 5'end of RNAtranscript)技术,利用含SfiⅠ B酶切位点的ol
【机 构】
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集美大学水产生物技术研究所,香港城市大学生物与化学系香港九龙
【基金项目】
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国家自然科学基金，福建省自然科学基金，教育部高校骨干教师资助计划
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采用RDP试剂提取日本对虾精巢和卵巢的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mRNA.根据SMART(switching mechanism at 5'end of RNAtranscript)技术,利用含SfiⅠ B酶切位点的oligo(dT)引物合成cDNA第一条链,利用含SfiⅠ A酶切位点的SMART核苷酸作为cDNA第一条链在mRNA 5'端延伸出去的模板,采用LDPCR引物合成双链cDNA,双链cDNA用SfiⅠ酶切和过柱分级分离后,与λ TriplEx2两臂进行连接,随后
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