【摘 要】
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目的:探讨miR-367影响冠心病不稳定斑块形成的机制.方法:收集急性心肌梗死(AMI)和稳定性心绞痛(SA)的汉族和维吾尔族患者及健康对照者血浆样本各60例,采用高通量miRNA芯片检
【机 构】
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新疆医科大学第一附属医院心脏中心冠心痛一科 乌鲁木齐,830054;新疆医科大学第五附属医院内分泌科
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目的:探讨miR-367影响冠心病不稳定斑块形成的机制.方法:收集急性心肌梗死(AMI)和稳定性心绞痛(SA)的汉族和维吾尔族患者及健康对照者血浆样本各60例,采用高通量miRNA芯片检测患者血浆差异表达的miRNAs;通过PieTar、TargetScan、miRWalk数据库分析预测候选miRNAs的靶基因并通过DAVID数据库筛选确定目的基因;荧光定量PCR检测候选miRNAs在各组患者中的表达水平;通过构建人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的候选miRNAs敲低和过表达细胞系验证候选miRNAs对血管生成的作用;使用双荧光素酶报告基因实验检测候选miRNAs与目的基因的靶向性,并通过Western Blot验证候选miRNAs对靶基因蛋白表达的影响.结果:芯片结果显示,miR-367在两民族AMI患者中表达下调;DAVID筛选预测miR-367与VEGFR-2存在靶向结合位点;较对照组而言,AMI患者miR-367表达显著降低(P＜0.00l);干扰HUVEC细胞中miR-367的表达显著促进了细胞的增殖和迁移,过表达miR-367后HUVEC细胞功能受到明显阻滞;双荧光素酶报告实验显示野生型VEGFR-2基因共转染miR-367过表达载体后荧光素酶活性较对照组显著降低;敲低HUVEC细胞中miR-367表达后,细胞内VEGFR-2蛋白表达显著升高.结论:血浆循环miR-367在AMI患者中表达减少,miR-367可能通过负调控VEGFR-2的表达对血管内皮细胞产生调控作用.
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