草鱼体外培养细胞中β-萘黄酮对CYP1A基因表达的诱导

• 作 者: 林茂 杨先乐 纪荣兴
• 机 构: 集美大学水产学院,上海海洋大学农业部渔业动植物病原库
• 出 处: 水产学报
• 发表日期: 2010年6期
• 关键词: 草鱼 细胞 CYP1A CDNA 诱导 grass carp（ Ctenopharyngodon idellus） cell CYPIA cDNA

为了建立以CYP1A cDNA为探针的水环境毒理学细胞模型，以β-萘黄酮（BNF）作为诱导剂，通过半定量PCR技术研究CYP1A在草鱼不同细胞系及其对应组织中的诱导表达情况。在半定量PCR反应参数研究中，对关键的退火温度和循环次数进行了优化，结果显示退火温度为57℃，循环次数为30次较为合适，该条件下Gauss迹量的CYP1A／ACT比值能更准确的反映CYP1A的表达水平。对照组和诱导组草鱼细胞中ACT和CYP1A cDNA扩增结果表明，细胞中CYP1A的基础表达量较低，而BNF诱导使GCL、CIK和CO