马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆和结构分析

来源 :内蒙古大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:Ricky_C
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以马铃薯基因组DNA为模板并基于天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的cDNA序列所设计的两个引物,通过PCR扩增得到666bp的天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因编码区,并将此片段克隆到pUC18的SmaI位点.序列分析结果表明该基因除去末端一终止密码子外其可译框架编码221个氨基酸残基,前导肽包括32个氨基酸残基,故该抑制剂的成熟蛋白由189个氨基酸组成,第67位的精氨酸为抑制胰蛋白酶的活性中心.与cDNA相比核苷酸的同源性为94.3%,氨基酸的同源性为90%.基因DNA无内含子. Two primers designed by using genomic DNA of potato as template and based on the cDNA sequence of aspartic protease inhibitor gene were used to amplify the coding region of aspartyl protease inhibitor gene of 666 bp by PCR and cloned into SmaI site of pUC18. Sequence analysis showed that the deduced 221 amino acid residues except for the terminal stop codon of the gene contained 32 amino acid residues in the leader peptide. Therefore, the mature protein of the inhibitor consists of 189 amino acids, and the 67th Arginine is the active center that inhibits trypsin. Compared with cDNA, the homology of nucleotide was 94.3% and that of amino acid was 90%. Gene DNA without introns.
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