【摘 要】
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目的 探讨端粒酶反转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)过表达及RNA干扰慢病毒载体对缺氧肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的
【机 构】
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中国人民解放军第九四医院重症医学科,南昌江西,330002
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目的 探讨端粒酶反转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)过表达及RNA干扰慢病毒载体对缺氧肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的影响.方法 分别构建Plvx-IRES-ZsGreen1-TERT过表达载体和Plvx-shRNA2-TERT干扰载体,培养PASMCs后分为正常对照组、缺氧对照组、空白载体组、TERT过表达组和TERT干扰组,采用CCK-8法进行细胞增殖能力检测,采用流式细胞仪法进行细胞凋亡和细胞周期检测.结果 Plvx-IRES-ZsGreen1-TERT过表达载体和Plvx-shRNA2-TERT干扰载体构建成功后均经测序验证序列正确.缺氧对照组在24h和48 h时吸光度值较正常对照组明显增加,低氧48 h时G1期细胞比例明显下降,S期细胞比例明显升高,细胞凋亡比例减少(P＜0.05);TERT过表达组在低氧24h和48 h时的吸光度值较缺氧对照组明显升高,低氧48 h时G1期细胞比例较缺氧对照组明显减少,S期细胞比例明显升高(P＜0.05);TERT干扰组在低氧24h和48 h时的吸光度值较缺氧对照组明显减少,低氧48 h时G1期细胞比例较缺氧对照组明显升高,S期细胞比例明显下降,细胞凋亡比率明显升高(P＜0.05).结论 低氧时TERT RNA干扰能促进细胞凋亡,减少PASMCs核酸合成,从而抑制PASMCs增殖.
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