小鼠肝脏体外复灌系统的建立

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目的建立小鼠肝脏体外复灌系统,并验证其有效性。方法 6只雄性C57小鼠获取肝脏后冷保存45 min内行体外复灌,复灌前获取同种属小鼠血液配制复灌液。小鼠复灌系统以多轴蠕动泵作为动力,实行门静脉单通道灌注,在灌注系统中加入输液器滴斗以缓冲压力和排气,2个小动物膜式氧合器串联以达到携氧要求,灌注系统总液体量约30 mL,复灌流量设定为2.5 mL·min-1·g-1。采用双托盘形式,满足小鼠肝脏正常体位。应用生物机能实验系统记录入肝压力等灌注参数,监测灌注液ALT、AST、肝组织病理及细胞凋亡等指标。结果小鼠肝脏体外复灌过程中,门静脉压力低于8 mmHg,系统压力波动小于1 mmHg,灌注液pH值维持在7.40±0.05。复灌6 h结束时,灌注液ALT、AST和乳酸脱氢酶分别为(62±14)、(160±23)和(682±71) U/L,乳酸为(3.2±0.1) mmol/L。肝组织病理示肝小叶结构完整,实质细胞无明显坏死,病理学评分(1.1±0.7)分。原位缺口末端标记法检测肝细胞凋亡率为(0.57±0.22)%。结论本研究国内首次构建了小鼠肝脏体外复灌系统,操作简单、运行稳定,能够较长时间维持肝脏正常生理功能。
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