从随机9肽库中筛选HCV抗原表位

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目的:用患者血清中抗HCV抗体从随机9肽库中筛选HCV抗原表位.方法:将病人血清用硫酸铵粗提后,用ProteinA亲和层析柱纯化和制备抗HCV多克隆抗体;以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机9肽库进行亲和筛选.结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至5.0×10-3、假阳性率逐轮降低至0.2%,提示具有良好的富集效果.从第三轮挑选出的15个克隆进行结合试验,发现7个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清反应;测序表明6个克隆的外源肽含有核心序列SPVAXVLXT.用阳性噬菌体克隆检测20
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