猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用

• 作 者: 李丹丹 王绥家 陈平亚 张体银 杨俊兴 刘忠梅 高慎阳
• 机 构: 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心,深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心,辽宁医学院畜牧兽医学院
• 出 处: 中国实验动物学报
• 发表日期: 2018年2期
• 关键词: 猴免疫缺陷病毒 SIV30蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体 simian immunodeficiency virus SIV30 protein immune
• 基金项目: 国家质检总局科技项目(No.2013IK031,No.2013IK051,No.2015IK089),福建省科技计划重点项目(No.2014N0001),海南省应用技术研究与开发专项项目(No.ZDXM20130025),广东检验检疫局科技计划项目(No.2011GDK44,No.2013GDK04)

目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG。方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测。结果 最佳抗原包被量为0.02 mg/mL;制备好的IC均能够特异性检测到相应的SIV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明