【摘 要】
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目的 :探讨survivin基因沉默对白血病K562细胞增殖、凋亡、周期分布以及下游调控分子Beclin 1、caspase 3和X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis prote
【机 构】
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兰州大学第一临床医学院血液科,兰州大学第一医院中心实验室,
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目的 :探讨survivin基因沉默对白血病K562细胞增殖、凋亡、周期分布以及下游调控分子Beclin 1、caspase 3和X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)表达的影响。方法 :构建含有靶向抑制survivin基因表达的小发夹RNA(small hairpin RNA,sh RNA)序列的LV-survivin-sh RNA慢病毒载体,并将其感染白血病K562细胞;同时,设置未感染的空白对照组和感染无关对照RNA病毒载体的阴性对照组。MTT法检测细胞生长状况,FCM法检测细胞周期分布与细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测Beclin 1、caspase 3和XIAP m RNA水平,蛋白质印迹法检测caspase 3和XIAP蛋白表达。结果 :与2个对照组相比,survivin基因沉默组的细胞生长受到明显抑制(P值均<0.05),细胞凋亡率提高(P值均<0.05);细胞周期发生S期阻滞(P值均<0.05)。sh RNA干扰抑制survivin基因表达后,caspase 3的表达水平升高(P<0.05),XIAP的表达水平下降(P<0.05),而Beclin 1的表达没有明显改变(P>0.05)。结论 :Survivin基因沉默可抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于S期。推测survivin可能通过对下游caspase 3和XIAP基因表达的调控来发挥功能。
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