应用噬菌体肽文库筛选mAb F3特异性结合肽

• 作 者: 王长军 唐家琪 王登高 陶开华 李先富 潘秀珍 郭恒彬
• 机 构: 南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210002
• 出 处: 细胞与分子免疫学杂志
• 发表日期: 2002年6期
• 关键词: 汉坦病毒 噬菌体展示肽文库 中和抗体 抗原表位 hantanvirus phage display peptide library neutralizing a
• 基金项目: pharmacy Fund program

目的应用噬菌体展示肽文库筛选可与汉坦病毒囊膜蛋白中和性单抗(mAb) F3特异性结合的配体肽. 方法以F3 mAb为筛选配基, 对噬菌体展示的随机12肽文库进行3轮生物亲和淘选; 用夹心ELISA和竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性, 并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析.结果通过3轮生物淘选, 能被抗体捕获的噬菌体克隆为21/22. ELISA测定显示, 筛选到的噬菌体短肽能与F3 mAb特异性结合. 序列分析表明, 7个阳性克隆氨基酸序列相同, 均为-MHGPTKNQMWHT; 同源性分析显示, 该序列与HTNV/SEOV M蛋白G2区第750～759位氨基酸有较高的同源性.结论本研究为基于表位水平的HFRSV特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要的依据.