5匹马外周血单个核细胞表达MHC-Ⅰ类分子的差异分析

• 作 者: 马建 郭巍 沈楠 孔宪刚 沈荣显 周建华
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,东北林业大学野生动物资源学院
• 出 处: 畜牧兽医学报
• 发表日期: 2007年12期
• 关键词: 马 经典主要组织相容性复合体Ⅰ类分子 多态性 反转录一聚合酶链式反应 horse classical MHC class polymorphysm RT
• 基金项目: 黑龙江省发展高新技术产业专项资金项目（FW058007）,中国农业科学院一级岗位杰出人才基金

基于RT-PCR方法，扩增了用于马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus，EIAV）减毒疫苗株CTL表位研究的5匹马的编码经典MHC—I类分子的大部分基因，具体包括编码肽结合区大部分区域、α3区、穿膜区及胞浆区蛋白的基因，并进行了PCR产物的克隆和测序。试验马匹外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cells，PBMC）的总RNA提取物经RT-PCR扩增，并将所得产物进行T-A克隆。从每匹马的所有克隆中，分别随机挑取鉴定为阳性重组