一种改良大鼠肝脏Kupffer细胞分离方法

• 作 者: 张哲 赵曙光 倪阵 刘震雄 唐华 李慧艳 闻勤生
• 机 构: 第四军医大学唐都医院消化内科
• 出 处: 胃肠病学和肝病学杂志
• 发表日期: 2012年11期
• 关键词: KUPFFER细胞 细胞分离 原代培养 细胞鉴定 Kupffer cell Cell isolation Primary culture Cell identi
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（No：81170376）,陕西省中医药管理局科研项目（N0：2009jc53）

目的观察改良大鼠肝脏Kupffer细胞（KCs）分离方法获取KCs的效果。方法参照Akira提供的方法进行以下改进：①前灌注液在体灌注，Ⅳ型胶原酶离体灌注消化；②Percoll分离液不连续密度梯度离心；③台盼蓝染色检测分离细胞的活度；④选择性贴壁法纯化获取的细胞；⑤吞墨实验、DAB染色及CD163细胞免疫荧光法鉴定所分选细胞。结果肝脏KCs的获得量为（3±1．5）×10^5／g鼠肝，细胞活度〉92％；光镜下细胞呈圆形，培养24h后呈梭形或多角形；具有较强的吞噬能力，DAB染色呈“煎蛋”