共同抑制mTORC2和热休克蛋白90对多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响

• 作 者: 傅云峰 张亚男 张帆 刘竞 桂嵘
• 机 构: 410013 长沙，中南大学湘雅三医院,410013 长沙，中南大学湘雅三医院,410013 长沙，中南大学湘雅三医院,410013 长沙，中南大学湘雅三医院,410013 长沙，中南大学湘雅三医院,
• 出 处: 中华血液学杂志
• 发表日期: 2015年36期
• 关键词: 雷帕霉素 多发性骨髓瘤 细胞凋亡 mTORC2信号通路 HSP90热休克蛋白质类抑制剂

目的

探讨共同抑制mTORC2信号通路和热休克蛋白90对多发性骨髓瘤（MM）细胞AKT蛋白表达及细胞凋亡的影响。

方法

采用雷帕霉素（20 nmol/L）、17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素（17-AAG）（600 nmol/L）分别及两药联合处理MM细胞株U266、KM3细胞0、8、24、48 h, MTT法检测其对细胞增殖的影响；流式细胞术检测其对细胞凋亡及细胞周期的影响；Western blot法检测其对p-AKT（ser473）、p-AKT(thr450）、p-S6(S235/236）及AKT蛋白表达的影响。

结果

与空白对照组比较，雷帕霉素、17-AAG分别及两药联合后均可抑制U266、KM3细胞增殖，尤以联用后抑制作用最为明显（P值均<0.05）；均可使细胞周期阻滞在G₁期，尤其在作用48 h时周期阻滞最明显（P值均<0.01）；处理48 h后空白对照组、雷帕霉素组、17-AAG组、两药联用组KM3细胞的凋亡率分别为（12.21±0.89）%、（18.88±1.83）%、（21.04±0.60）%、（60.07±2.13）%，U266细胞的凋亡率分别为（8.72±0.15）%、（16.45± 0.65）%、（17.14±0.59）%、（54.25±1.76）%，与空白对照组比较差异均有统计学意义，两药联用组促凋亡作用更为明显（P值均<0.01）。雷帕霉素作用48 h后可抑制mTORC2信号通路；单用雷帕霉素或17-AAG时可降低AKT蛋白的表达，两药联用作用更为明显（P值均<0.01）。

结论

共同抑制mTORC2和HSP90活性可降低AKT蛋白的表达，在体外可明显促进MM细胞株U266、KM3细胞的凋亡。