【摘 要】
：
将除去3'端跨膜区的猪瘟病毒E2基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,获得重组质粒pFBHT-E2,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,发生转座作用,经抗性及蓝白
【机 构】
：
西北农林科技大学,农业部动物检疫所,西北农林科技大学
【基金项目】
：
陕西省科技攻关项目，陕西省重点实验室基金，国家流行病学专题项目
论文部分内容阅读
将除去3'端跨膜区的猪瘟病毒E2基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb,获得重组质粒pFBHT-E2,转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,发生转座作用,经抗性及蓝白斑筛选得到含E2基因的重组载体质粒rBacmid-E2,以脂质体介导的方法将此重组载体质粒转染sf9昆虫细胞,获得重组病毒,命名为rvBac-E2.经SDS-PAGE和Western-blot及ELISA等方法检测,结果表明,此E2基因在昆虫细胞中正确表达,表达的蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应.
其他文献
依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8^+T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8^+T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两条编码LCMV和OVACD8^+T细胞表位
根据基因库中新城疫病毒(NDV)的NP基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术对广西在2000～2003年暴发新城疫的鸡群中分离的11株NDV毒株NP基因进行RT-PCR扩增和序列测定,拼
参考GenBank中的MDPV FM株和GPV B株全基因序列,设计并合成一对引物,分别对MDPV GD株和GPV GD株的结构蛋白基因(VP1)进行PCR扩增,并克隆到pMD18-T载体,筛选到重组质粒并测序.
广西一些养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊等为特征的流行性传染病，怀疑为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)所致。利用针对PRRSV的N基因的特异性引物P1和P2，通过RT-PCR技
根据GenBank中猪Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)基因序列,设计两对特异性引物.将PCV-2广东分离株(GD1株)用PK15细胞系培养,从细胞培养物中提取病毒总DNA并以之为模板,用PCR方法分段扩增
从健康仔猪前腔静脉无菌采血,分离外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,用猪γ干扰素(IFN-γ)基因特异性引物通过RT-PCR扩增猪IFN-γ的全长cDNA序列,将其克隆到pMD18-T载体中,再
根据GenBank中A／Swine／Hong Kong/126／82(H3N2)株猪流感病毒(SIV)NP基因核苷酸序列设计合成一对引物，经RT-PCR扩增了我国SIV分离株A／Swine/Heilongjiang／3／2000(H3N2)的核蛋白(NP)基
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25-4株ApxⅡCA基因用特异性引物进行PCR扩增并克隆到T载体上，构建重组质粒pMD18-ApxⅡCA，将pMD18-ApxⅡCA转化到E．coliJM83中并测序。序列分
1病原简介猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的，以母猪的繁殖障碍、哺乳仔猪的高死亡率及呼吸症状
根据GenBank中发表的GPMV SF02株的NP基因的核苷酸序列设计合成一对引物,采用RT-PCR扩增出与预期设计的1470bp大小相符的片断,将此扩增产物克隆入PMD18-T载体,进行序列测定和