钛及氧化锆表面微沟槽结构对人牙龈成纤维细胞生物学行为的影响

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目的

探讨钛及氧化锆表面微沟槽结构对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)生物学行为的影响,以期为种植体穿龈部分寻找合适的材料及表面处理方法。

方法

利用精细加工切片系统在钛和氧化锆试件表面制备微沟槽,沟槽顶宽60 μm,沟槽宽60 μm,沟槽顶到沟槽底深度10 μm。实验分为光滑钛组、光滑氧化锆组、微沟槽钛组和微沟槽氧化锆组(每组5个试件),用扫描电镜、原子力显微镜、接触角测量仪、能量色散X射线分析观察各组试件表面形貌(沟槽宽度及深度)并测量表面粗糙度、静态接触角以及进行元素分析。通过免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜观察HGF的黏附形态,利用细胞活性试剂盒检测培养6 h,1、3、5、7 d的细胞增殖情况,通过实时荧光定量PCR检测细胞黏附早期(6 h)和晚期(3 d)整合素α5、β1和Ⅰ型胶原mRNA表达水平。

结果

光滑钛组和光滑氧化锆组表面粗糙度分别为(63.23±2.55)和(26.78±3.11)nm。微沟槽氧化锆组的静态接触角最小,为51.2°±2.0°。两个沟槽组表面HGF均顺着沟槽排列,培养6 h至7 d的各时间点微沟槽氧化锆组HGF增殖均显著多于其他组(P<0.05)。黏附早期微沟槽氧化锆组整合素α5 mRNA表达量最大(P<0.05),各组整合素β1及Ⅰ型胶原mRNA表达量差异均无统计学意义(P>0.05);黏附晚期两个沟槽组整合素α5、β1和Ⅰ型胶原mRNA表达量均显著大于两个光滑组(P<0.05)。

结论

氧化锆表面粗糙度较小,其中微沟槽氧化锆亲水性较好,可引导HGF顺沟槽排列,有利于HGF黏附、增殖及结构蛋白和功能蛋白的表达。

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