SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定

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目的克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的DNA,构建原核表达质粒pGEX-2T/N,并诱导表达.方法采用RT-PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段.将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌中表达融合蛋白.用表达产物与抗SARS-CoV抗体阳性血清做Western blot.结果获得N基因片段;GST-N融合蛋白以可溶形式表达;Western blot检测表明,其与抗SARS-CoV抗体阳性血清的反应呈阳性.结论成功地构建原核表达质粒pGEX-2T/N,并
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