应用噬菌体肽文库筛选McAb F3特异性结合肽

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangwei4833250
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目的应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽. 方法采用protein-A亲和层析纯化的F3 单抗为筛选配基,对噬菌体展示的随机12肽文库进行生物亲和淘洗;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析. 结果通过3轮生物淘洗,能被抗体捕获的噬菌体克隆为91.7%(11/12);ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽能与F3单抗特异性结合;序列分析表明7个阳性克隆氨基酸序列相同,均为-MHGPTKNQMWHT,同源性分析显示该序列与HTNV/SEOV M蛋白G2区第750~759位氨基酸有较高的同源性. 结论获得了具有良好结合活性的模拟表位肽,为基于表位水平的HFRSV(肾病综合征出血热病毒)特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要依据.

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