猪耳成纤维细胞的体外培养及EGFP基因的转染

• 作 者: 刘伟 吴华莉 张德福
• 机 构: 上海市农业科学院畜牧兽医研究所,南京农业大学动物科技学院
• 出 处: 上海农业学报
• 发表日期: 2007年4期
• 关键词: 猪 耳成纤维细胞 绿色荧光蛋白基因 Pig Ear skin fibroblast EGFP
• 基金项目: 上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字（2005）第14-1号],上海市科学技术委员会项目（014909005,04DZ05611）,上海市自然科学基金项目（98ZC14025）

优化脂质体Liperfectamin 2000转染EGFP（加强型绿色荧光蛋白）至猪耳成纤维细胞的参数，如DNA和脂质体的用量、细胞汇合度、细胞暴露于DNA和脂质体复合物的时间。试验显示：24孔板内1．0μg DNA和2．4μL脂质体的用量转染效率最高，DNA和脂质体过量会对细胞产生毒性，影响转染效率；细胞汇合85％～90％才能得到较高的转染效率；细胞暴露4h转染效率最高，时间过长反而使转染效率下降。