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目的 建立受强力霉素(doxycycline)调控表达的人肝癌HepG2细胞系.方法用阳离子脂质体lipofectamine 20000将pTet-on质粒转染人肝癌HepG2细胞,通过G418筛选得到稳定转染的抗性克隆;将抗性克隆细胞分别培养扩增,通过pTRE-luc质粒瞬时转染,加入终浓度为1 μg/ml的doxycycline诱导剂培养48 h后,逐一检测每个细胞株的荧光素酶表达活性.结果第6号克隆的细胞诱导后荧光素酶的表达活性为16764,而非诱导状态下该细胞株的背景活性为87,诱导后的活性增加192倍.结论 HepG2/Tet-on细胞株是可调控基因表达的人肝癌细胞株,为研究肝癌的发病和基因治疗提供了较为理想的研究工具。