【摘 要】
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目的 研究硫化氢(H2S)对大鼠海马神经元氧-糖缺失/恢复损伤的影响.方法 新生(24～48 h内)Wistar大鼠断头,迅速取出海马,应用0.125%胰酶消化,海马神经元在96孔和6孔培养板上培养
【机 构】
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昆明医学院附属第一医院麻醉科,沈阳市
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目的 研究硫化氢(H2S)对大鼠海马神经元氧-糖缺失/恢复损伤的影响.方法 新生(24～48 h内)Wistar大鼠断头,迅速取出海马,应用0.125%胰酶消化,海马神经元在96孔和6孔培养板上培养10 d后随机分为5组:正常培养组(Ⅰ组)、氧-糖缺失/恢复组(Ⅱ组)、氧-糖缺失/恢复+50μmol/L NaHS组(Ⅲ组)、氧-糖缺失/恢复+100 μmol/L NaHS组(Ⅳ组)和氧-糖缺失/恢复+200 μmol/LNaHS组(Ⅴ组).Ⅱ组神经元进行氧-糖缺失45min后换回原来的培养液,然后放回原培养箱培养24h,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组在氧-糖缺失时加入NaHS,使其终浓度分别为50、100、200 μmol/L,余处理同Ⅱ组,Ⅰ组按正常培养方法培养.检测96孔培养板神经元活力.鉴定6孔培养板的神经元纯度并进行细胞色素C水平、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)浓度和神经元凋亡的检测.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组MDA浓度、细胞色素C水平和神经元凋亡率升高,GSH浓度和神经元活力降低(P＜0.05);与Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组和Ⅴ组MDA浓度、细胞色素C水平和神经元凋亡率降低,GSH浓度和神经元活力升高(P＜0.05);与Ⅲ组比较,Ⅳ组和Ⅴ组MDA浓度、细胞色素C水平和神经元凋亡率降低,GSH浓度和神经元活力升高(P＜0.05);与Ⅳ组比较,Ⅴ组MDA浓度、细胞色素C水平和神经元凋亡率降低,GSH浓度和神经元活力升高(P＜0.05).结论 外源性H2S可减轻大鼠海马神经元氧-糖缺失/恢复损伤,其机制可能与其提高机体的抗氧化能力、减少神经元的凋亡有关.
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