Survivin启动子的克隆及其在膀胱癌细胞BIU87中的活性鉴定

来源 :现代实用医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pigyu

【摘要】

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目的克隆Survivin启动子的有效片段,并检测其在人膀胱癌细胞株BIU87和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的转录活性。方法用PCR扩增Survivin基因的启动子片段,克隆入荧光素酶报告

【作者】

：

严泽军程跃蒋军辉胡嘉盛施小东黄坚成

【机构】

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宁波市第一医院

【出处】

：

现代实用医学

【发表日期】

：

2011年11期

【关键词】

：

SURVIVIN 启动子膀胱肿瘤基因治疗 Survivin Promoter Bladder neoplasm Gene therapy

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目的克隆Survivin启动子的有效片段,并检测其在人膀胱癌细胞株BIU87和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的转录活性。方法用PCR扩增Survivin基因的启动子片段,克隆入荧光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3BSurvivin重组质粒,用脂质体法瞬时转染BIU87及SV-HUC-1中,检测Survivin启动子在细胞中的转录活性。同时构建含CMV启动子的pGL3BCMV重组质粒作为阳性对照。48h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性。结果成功克隆440 bp的Surv

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