多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3疫苗的构建及鉴定

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wrothnpc
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目的 构建和鉴定多房棘球绦虫重组BCGEm14—3—3疫苗。方法 超声粉碎泡球蚴组织提取总RNA,通过RT—PCR扩增获得Em14—3-3的cDNA,将该基因定向克隆到大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG的人结核分枝杆菌热休克蛋白(HSP)70启动子下游构建重组质粒pBCG—Em14-3—3,用电穿孔法将该质粒导入BCG构建多房棘球绦虫重组BCG-Em14—3—3疫苗。将该疫苗接种到含12μg/ml、HgCl2的罗氏培养基筛选培养3周。结果 重组pBCG—Em14—3-3质粒经酶切证实构建成功,rBC
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