【摘 要】
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目的体外构建人肝细胞核因子4α（HNF4α）基因真核表达载体,并初步鉴定其在Hep G2细胞的表达。方法从肝癌手术患者获得肝组织,分离得到肝组织总RNA,将其逆转录合成c DNA,经特异
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目的体外构建人肝细胞核因子4α（HNF4α）基因真核表达载体,并初步鉴定其在Hep G2细胞的表达。方法从肝癌手术患者获得肝组织,分离得到肝组织总RNA,将其逆转录合成c DNA,经特异性引物扩增HNF4α基因片段,将其定向连接到pc DNA3.1（＋）真核表达载体,经抗生素筛选后,酶切及测序鉴定其序列正确。提取质粒,转染Hep G2细胞,48 h后裂解细胞,应用抗HNF4α行Western blot检测目的蛋白。结果从临床肝癌患者肝组织中成功分离得到总RNA,扩增出HNF4α基因,经筛选、酶切鉴定和测序
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