【摘 要】
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目的:研究索拉菲尼(Sorafenib)诱导的自噬在肝癌细胞凋亡中的作用。方法:体外培养肝癌细胞Huh7和LH86细胞株。分为对照组、Sorafenib处理组、Bafilomycin处理组、Sorafenib+B
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院,大连医科大学肿瘤干细胞研究院
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目的:研究索拉菲尼(Sorafenib)诱导的自噬在肝癌细胞凋亡中的作用。方法:体外培养肝癌细胞Huh7和LH86细胞株。分为对照组、Sorafenib处理组、Bafilomycin处理组、Sorafenib+Bafilomycin处理组。将构建的质粒表达载体p EGFP-N1-LC3分别转染Huh7和LH86细胞株,用索拉菲尼或者索拉菲尼加Bafilomycin同时处理细胞,通过荧光显微镜观察对照组和处理组细胞内细胞自噬小体形成情况。免疫印迹(Western blot)方法检测细胞自噬作用标志蛋白LC3以及细胞凋亡蛋白Caspase 3切割条带在各组中的表达,Heochst 33342染料对各组细胞核进行染色,以评估细胞自噬作用对索拉菲尼诱导细胞凋亡的影响。结果:在荧光显微镜下,可以观察到Sorafenib能够显著诱导两种肝癌细胞株发生自噬作用。抑制剂Balfilomycin能够显著抑制Sorafenib诱导的自噬作用。Balfilomycin抑制自噬能够显著增强Sorafenib诱导的细胞凋亡。结论:Sorafenib能够诱导肝癌细胞产生自噬作用。这种自噬作用在Sorafenib诱导的肝癌细胞凋亡中起到负调控作用。
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