Autotaxin在sf9昆虫细胞的表达及纯化研究

• 作 者: 赵峰梅 潘薇薇 曹鹏程 赵亚蕊 何永吉 赵邑
• 机 构: 山西省生物研究所
• 出 处: 中国生化药物杂志
• 发表日期: 2017年1期
• 关键词: 自分泌运动因子 sf9昆虫细胞 Bac-to-Bac表达系统 lysoPLD活性 Autotaxin sf9 insect cell Bac-to-Bac ex
• 基金项目: 国家国际科技合作专项项目（2014DFA30270）

目的 通过sf9昆虫细胞表达人Autotaxin（ATX）,获得具有生物学活性的目的蛋白。方法 采用TRIzol法提取人的黑色素瘤细胞总RNA,通过RT-PCR获得人ATX基因,构建p Fast BacTMHTA-ATX,Bacmid-ATX重组质粒,脂质体转染sf9昆虫细胞,收获重组ATX病毒;重组病毒侵染sf9昆虫细胞表达人ATX;通过His TrapTMHP和Hi Load 16/600 Superdex 200pg柱两部纯化获得目的蛋白并测定其磷脂酶D（lysophospholipase D,ly