成人胰岛细胞的分离

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目的 探讨成人胰岛细胞的分离及胰腺冷缺血时间与胰岛细胞活率的关系.方法采取胰、肾联合切取,经腹主动脉插管,用自制的灌注器以高渗枸橼酸盐嘌呤溶液(HC-A液)1500~2000ml进行原位灌洗.将肾与胰腺、十二肠、脾分离,采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,以双硫腙及丫腚橙染色,测定所得到的胰岛细胞的纯度及活率.结果胰腺的冷缺血时间为2.5~8h,温缺血时间为0~3min.胰岛收获量为(2 38±0.67)×103 IEQ/g,纯化后胰岛细胞的活率为19%~83%,冷保存指数(或输注指数)为9.8~66.4.胰岛细胞的活率与胰腺的冷缺血时间呈负相关,冷保存指数和胰岛细胞活率呈负相关.结论以高渗枸橼酸盐嘌呤溶液灌洗、胶原酶P消化胰腺所得到的胰岛细胞活率高,但胰腺的冷缺血时间不宜超过5 h。

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