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肝细胞是高度分化的细胞，具有丰富的酶系及多种特异性功能，被广泛用于生物化学、实验性肝损伤、药代动力学、毒理学和致癌作用等研究；而原代培养的肝细胞是肝细胞移植、生物人工肝的最佳生物材料。目前制备离体肝细胞常用的方法有非酶分离细胞法、离体肝脏酶消化分离法以及在体肝脏酶灌注法。这些分离培养肝细胞的技术均被广泛采用，但各种技术间缺乏系统的归类。本文对体外肝细胞来源、各种分离方法和笔者的一些实际工作体会做一综述。