人可溶性CD40L表达及其生物学活性初步分析

• 作 者: 赵振国 彭家和 彭彦孟 鲁立。 甘淋 何凤田 江渝
• 机 构: 第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,第三军医大学学员旅
• 出 处: 重庆医学
• 发表日期: 2007年20期
• 关键词: CD40L 原核表达 蛋白分离纯化 CD40L prokaryotic expression protein isolation and purificati

目的将已构建好的重组表达质粒pET28a＋-sCD40L进行优化条件表达，并将其目的蛋白纯化，对目的蛋白进行初步的活性分析。方法利用已构建好的重组表达质粒pET28a＋-sCD40L进行目的蛋白的表达，优化表达的条件，利用Western-blot鉴定目的蛋白，在最适条件下进行目的蛋白的表达，利用Ni^2-NTA柱纯化目的蛋白，MTT法检测重组蛋白对人外周血淋巴细胞增殖活性的影响。结果利用Ni^2＋-NTA柱将目的蛋白进行了分离纯化，且纯化的重组蛋白具有刺激人外周血淋巴细胞的增殖。结论成功优化了重组表达质粒