利用CRISPR／Cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌O157：H7StxII基因表达

• 作 者: 樊欢 吴涛 朱小娟 葛以跃 曾晓燕 焦永军 史智扬 朱凤才
• 机 构: 江苏省疾病预防控制中心
• 出 处: 江苏预防医学
• 发表日期: 2016年5期
• 关键词: CRISPR/Cas9基因编辑技术 EHEC0157:H7菌株 志贺毒素 CRISPR/Cas9 genome editing technology EHEC
• 基金项目: 江苏省“六大人才高峰”人才选拔培养资助课题（2014SWYY-003）

目的利用cRIsPR／cas9基因编辑技术抑制肠出血性大肠埃希菌（EHEC）0157：H7 StxlI基因表达，并评价其对细菌生长的影响及细胞毒性。方法 针对EHEC 0157：H7 StxII基因设计引物，构建cRIsPR／Cas9表达质粒pdCas9-StxII并转化EHEC 0157：H7感受态细胞，采用RT—PCR及胶体金法检测StxII基因表达情况，绘制菌株生长曲线，将菌株培养上清液接种Vero细胞观察细胞病变情况。结果 测序分析显示pdCas9-StxlI表达质粒被成功构建；转化EHEC