猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组腺病毒的构建及特性研究

• 作 者: 马友记 赵兴绪 黄连清 李发弟 程小磊 柳纪省
• 机 构: 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃农业大学动物科学技术学院,中农威特生物科学技术股份有限公司
• 出 处: 甘肃农业大学学报
• 发表日期: 2008年01期
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 重组腺病毒 同源重组 PRRSV GP5 recombinant adenovirus homologous recombina
• 基金项目: 重大基础研究“973”前期专项（2004CCA00500）和国家社会公益基金研究专项（2005DIB4J041）.

将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-GP5,经酶切充分暴露反向末端重复序列,再与脂质体混合转染AD-293细胞,成功获得了AD-GP5复制缺陷型腺病毒,经检测证实AD-GP5稳定性好,安全性高.转录水平检测证实,GP5蛋白基因得到了转录;荧光检测发现,外源蛋白已