【摘 要】
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目的构建整合素α5基因（ITGA5）的短发卡RNA（shRNA）慢病毒表达载体,并建立稳定沉默ITGA5表达的肝癌细胞系Bel-7404。方法设计3条ITGA5基因特异性shRNA靶序列和1条非特异性序列作为
【机 构】
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宁夏医科大学,宁夏医科大学总医院消化内科,中国石油中心医院,宁夏回族自治区人民医院消化内科
【基金项目】
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宁夏医科大学优势学科群建设项目(2001060703)
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目的构建整合素α5基因（ITGA5）的短发卡RNA（shRNA）慢病毒表达载体,并建立稳定沉默ITGA5表达的肝癌细胞系Bel-7404。方法设计3条ITGA5基因特异性shRNA靶序列和1条非特异性序列作为阴性对照（NC）,分别克隆到GV493质粒载体中,转化感受态细胞后挑取阳性克隆子进行DNA测序鉴定,包装成重组慢病毒,并纯化、测定病毒滴度。将4组慢病毒载体分别感染人肝癌细胞Bel-7404,使用嘌呤霉素筛选后,在荧光显微镜下观察GFP的表达,q PCR和Western blot分别检测各组中ITGA
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