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目的
探讨噬菌体肽文库筛选人成骨细胞特异性多肽的实验方法,为钛种植体表面生物化修饰提供实验基础。
方法以人颅骨成骨细胞为靶细胞对噬菌体十二肽文库进行筛选,将获得的表面和内化两部分噬菌体分别培养,以人牙龈成纤维细胞为对照细胞,进行酶联免疫吸附测定,免疫荧光鉴定阳性噬菌体克隆并测序。
结果4轮筛选后,根据随机数字表随机挑选的噬菌体克隆中22个鉴定为阳性克隆,提取其单链DNA进行测序分析,其中出现频率最高(14次)的特异性多肽氨基酸序列为MGWSWWPETWPM。
结论利用噬菌体肽文库可成功筛选获得与成骨细胞特异性结合的多肽,为构建成骨细胞特异性识别的钛种植体表面提供实验基础。