【摘 要】
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为构建基于杆状病毒表达系统的CCV新型亚单位疫苗,将CCV的囊膜蛋白基因ORF6克隆至杆状病毒转座载体pFastBac^TM 1质粒中,并将阳性重组转座质粒转化进含穿梭载体Bacmid的感受
【机 构】
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华中农业大学水产学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,华中农业大学动物医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30901118), 教育部新教师基金项目(20070504047), 湖北省自然科学基金项目(2008CBB099), 华中农业大学教师启动基金项目(2006XRC047)
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为构建基于杆状病毒表达系统的CCV新型亚单位疫苗,将CCV的囊膜蛋白基因ORF6克隆至杆状病毒转座载体pFastBac^TM 1质粒中,并将阳性重组转座质粒转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得重组子rBacmid-ORF6。在脂质体介导下将该重组子转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒AC-ORF6。AC-ORF6感染的sf9昆虫细胞,经超薄切片电镜观察,可见重组杆状病毒呈多粒包埋,经间接免疫荧光、Western-blotting检测,CCV的ORF6蛋白可以在感染了AC-ORF6
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