【摘 要】
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漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,在有机农药残留和木质素的降解方面具有潜在的工业价值.从特异腐质霉Y1(Humicola insolens Y1)中分离到了漆酶基因Lacl,其全长1 803 bp,编码600
【机 构】
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河北农业大学生命科学学院,河北保定071000;中国农业科学院生物技术研究所,北京10081;河北农业大学生命科学学院,河北保定,071000
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漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,在有机农药残留和木质素的降解方面具有潜在的工业价值.从特异腐质霉Y1(Humicola insolens Y1)中分离到了漆酶基因Lacl,其全长1 803 bp,编码600个氨基酸,与NCBI蛋白数据库比对结果表明,与来源于Chaetomium globosum CBS 148.51 (XP_001228806)的多酚氧化酶序列相似性最高为71％,表明是一个新的漆酶基因.将其克隆入毕赤酵母表达载体pPIC9r中,通过PCR和SDS-PAGE检测证实基因已经整合入酵母基因组中且能分泌表达.在3L发酵罐中,重组Lac1蛋白表达量达到3.79mg/mL发酵液,酶活性达到1.3 U/mL发酵液.酶学性质分析结果显示,漆酶的最适作用温度为65℃,最适反应pH为4.5,且在pH 6～11的范围内酶的相对活力均在70％以上.
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