【摘 要】
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建立适用于从毕赤酵母菌中提取外源重组蛋白的超声破碎方法。采用Western Blotting免疫印记技术检测从毕赤酵母菌中提取的外源人脂联素蛋白活性,并以外源人脂联素蛋白活性作
【机 构】
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陕西省科学院酶工程研究所,陕西省酶工程技术中心,西北大学生命科学学院,陕西省微生物研究所
【基金项目】
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陕西省科学院科技计划项目(2011K-17);西北大学自主创新类项目(10YZZ36)
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建立适用于从毕赤酵母菌中提取外源重组蛋白的超声破碎方法。采用Western Blotting免疫印记技术检测从毕赤酵母菌中提取的外源人脂联素蛋白活性,并以外源人脂联素蛋白活性作为考察指标,采用单因素和L9（33）正交试验设计,对超声破碎条件进行优化。结果表明：在外源人脂联素蛋白活性最高的情况下,超声破碎条件为超声破碎功率450W、时间25min、时间间隔（工作时间：间歇时间）10：10（s/s）,此时细胞破碎率为（67.8±2.1）%。若在超声破碎时添加1mmol/L PMSF,虽对细胞破碎率并
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