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对基因工程构建的含重组人胰岛素和C肽基因的毕赤酵母工程菌进行诱导表达，工程菌用甲醇诱导72h后，离心去除菌体，上清液经中空纤维膜超滤后SP—Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析，0-400mmol／L NaCl梯度洗脱，得到纯度大于92％的重组人胰岛素原。经Lys—C酶和羧肽酶B-酶切后，Sephadex G-25柱分离，得到了重组人胰岛素和C肽。