【摘 要】
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用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可
【机 构】
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厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,
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用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可溶形式和包含体形式均有明显活性。包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90％以上,活性与纯化前相当,可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料。
The full-length gene encoding SARS-CoV nuclear protein (N) was synthesized by PCR and expressed in E.coli. The prokaryotic expression vector was constructed. Results The yield of recombinant N protein accounted for more than 40% of the total bacterial protein, mainly in soluble form. Western blot analysis of acute phase sera from patients with SARS showed significant activity both in soluble form and inclusion body form. Purified inclusion body form of the recombinant protein purity of up to 90% or more, activity and purification before, can be used as SARS antibody diagnostic kit antigen material.
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