粪肠球菌溶血素cylL基因的原核表达

• 作 者: 强华 蒋燕成 朱波 谢曼凌 吴小茜
• 机 构: 福建医科大学病原生物学系
• 出 处: 中国人兽共患病学报
• 发表日期: 2007年10期
• 关键词: 粪肠球菌 溶血素 原核表达 Enterococus faecalis hemolysin prokaryotic expression
• 基金项目: 福建省自然科学基金（C0510008）,福建省科技计划项目（C0101080）联合资助

目的克隆表达粪肠球菌溶血素cylL基因,为制备单抗、开发疫苗及其致病机制研究奠定基础。方法从粪肠球菌中扩增溶血素cylL基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET42a中,构建pET-cylL重组质粒。将pET-cylL质粒转化入大肠杆菌BL21（DE3）。经KpnI、XhoI酶切及测序鉴定,以IPTG诱导表达融合蛋白,用SDS-PAGE、Western blot进行分析。结果PCR体外扩增cylL基因产物约206bp,成功构建了重组表达质粒pET-cylL;SDS-PAGE、Western免疫印迹显示蛋