【摘 要】
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为制备猪TLR3（poTLR3）胞外区蛋白的多克隆抗体，从poTLR3克隆载体扩增胞外区基因序列连接到pGEX-4T-1载体上，转化大肠杆菌BL21（DE3），在IPTG的诱导下，表达GST-poTLR3融合蛋白，将表达的融
【机 构】
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甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（30871884）,转基因生物新品种培育重大专项（2009zx08008-OIOB）.
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为制备猪TLR3（poTLR3）胞外区蛋白的多克隆抗体，从poTLR3克隆载体扩增胞外区基因序列连接到pGEX-4T-1载体上，转化大肠杆菌BL21（DE3），在IPTG的诱导下，表达GST-poTLR3融合蛋白，将表达的融合蛋白纯化，免疫家兔制备抗体，并以间接ELISA法测定抗体效价，利用Western-blot和细胞免疫荧光验证抗体与真核表达蛋结合的白特异性．结果表明：制备的多克隆抗体的效价可达1：128000，poTLR3胞外区蛋白在大肠杆菌中得到高效表达，并且制备的多克隆抗体特异性好、滴度高．
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