马铃薯遗传转化系统的优化及禽流感病毒(H5N1)基因的导入

来源 :厦门大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:hquyuer
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通过对以马铃薯(Solanum tuberosum L.)块茎为受体的农杆菌转化系统进行优化,筛选出使三个品种(鲁引1号、克新3号、优金)的受体均可得到高频分化的培养基:MS+2.0 mg/L BA+3.0 mg/L ZT+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L GA.对几种农杆菌转化条件的比较研究发现,菌体用Ms+0.5 mg/L GA 液体重悬并稀释4倍,与受体于28 ℃,100 r/min振荡侵染20~30 min,共培养时在分化培养基上加30 μ mol/L AS(乙酰丁香酮),16 h弱光照共培养3 d,可使马铃薯品种鲁引1号的转化效率较常规方法提高5~7倍.将禽流感病毒(H5N1)基因与35S启动子及nos终止子构建表达载体p1301H5N1,直接法转入农杆菌EHA105,用此菌株转化马铃薯得到再生植株.基因组总DNA经PCR和Southern杂交证明目的基因已整合到马铃薯基因组中.
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