【摘 要】
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目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在异氟醚诱导原代培养大鼠心肌细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)中的作用.方法 1～3 d SD新生大鼠,分离培养原代心肌细胞,随机分为6组(n=6):对照组(C组)
【机 构】
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武汉大学人民医院麻醉科,武汉市第一医院麻醉科,华中科技大学附属同济医院麻醉科
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目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在异氟醚诱导原代培养大鼠心肌细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)中的作用.方法 1～3 d SD新生大鼠,分离培养原代心肌细胞,随机分为6组(n=6):对照组(C组)培养后的细胞不经任何处理;不同浓度异氟醚组(Ⅰ1组～Ⅰ3组)细胞分别经0.7%、1.4%、2.1%异氟醚处理6 h;PKC抑制剂组(P组)细胞培养液中给予PKC抑制剂--calphostin C,终浓度50 nmol/L;PKC抑制剂+异氟醚组(PI组)心肌细胞培养液中加入calphostin C 50 nmol/L后,置入无菌密闭容器,持续输入1.4%异氟醚6 h.采用ELISA法测定细胞培养液VEGF浓度,Western blot法测定心肌细胞PKC亚型的表达.结果 与C组比较,Ⅰ2组和Ⅰ3组细胞培养液VEGF浓度升高,Ⅰ2组胞浆PKCε表达下调,胞膜PKCε表达上调(P＜0.01),胞浆和胞膜PKCα、PKCδ和PKCζ表达差异无统计学意义(P＞0.05),P组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).与胞膜比较,C组和Ⅰ2组胞浆PKCα、PKCδ和PKCζ表达上调(P＜0.05).随异氟醚浓度升高细胞培养液VEGF浓度升高(P＜0.05).与Ⅰ2组比较,PI组细胞培养液VEGF浓度降低(P＜0.05).结论 异氟醚可通过PKCε从胞浆转位到胞膜的途径诱导心肌细胞分泌VEGF,是异氟醚心肌保护作用的机制之一.
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