禽蛋黄过敏原Gal d 6的重组表达、纯化鉴定

• 作 者: 黄伦辉 鲍会静 张嘉懿 李军普 崔亚琼 李柳栩 刘运德 李会
• 机 构: 天津医科大学医学检验学院,天津市南开医院医学诊断实验室,天津市儿童医院检验科
• 出 处: 食品工业科技
• 发表日期: 2020年13期
• 关键词: rGal d 6 重组表达 禽蛋黄过敏 特异性IGE recombinant Gal d 6recombinant expressionegg yolk all
• 基金项目: 天津医科大学校基金面上项目(81772259)

目的:建立表达蛋黄Gal d 6重组蛋白工程菌,并鉴定重组Gal d6蛋白免疫活性。方法:直接合成Gal d 6 DNA,与pET-28a构建重组质粒,转化E.coli BL21经IPTG诱导表达;优化表达条件制备重组Gal d 6蛋白,经镍离子亲和层析柱纯化得到纯品蛋白;纯化Gal d6蛋白经间接ELISA及western blot鉴定Gal d 6蛋白免疫活性。结果:经DNA测序、SDS-PAGE、禽蛋过敏血清鉴定表达Gal d 6蛋白具有免疫活性,经镍柱亲和层析获得单一条带。该工程菌最佳表达条件为3