【摘 要】
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目的:观察苦楝素对DNA损伤及损伤修复的影响.方法:体外采用苦楝素与小鼠胚胎肝细胞BNL CL2细胞株共培养,CCK-8检测肝细胞活力,吸光度检测肝细胞内ROS含量,Western blot检测γ
【机 构】
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上海中医药大学基础医学院生物教研室 上海,201203上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科;上海中医药大学基础医学院生物教研室 上海,201203;
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目的:观察苦楝素对DNA损伤及损伤修复的影响.方法:体外采用苦楝素与小鼠胚胎肝细胞BNL CL2细胞株共培养,CCK-8检测肝细胞活力,吸光度检测肝细胞内ROS含量,Western blot检测γ-H2AX、Parp-1、poly ADP-ribose蛋白表达,观察不同浓度苦楝素以及苦楝素不同作用时间对DNA损伤及损伤修复的影响.结果:随着苦楝素浓度升高,肝细胞BNL.CL2细胞活力逐渐下降(P <0.0001),ROS含量升高(P<0.05),同时γ-H2AX蛋白质含量随着苦楝素作用时间的延长而升高(P <0.0001).苦楝素作用0.5~1.0h Parp-1自身PAR化量达最高(P<0.05);而苦楝素作用时间自1~24 h Parp-1的PAR逐渐减少(P<0.05).结论:苦楝素可通过增加细胞内ROS诱导DNA损伤,同时抑制Parp-1的活性从而抑制DNA损伤的修复.
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