【摘 要】
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目的:控制中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子产品质量,研究其理化性质及生物学活性的定性和定量.方法:通过离子交换色谱、凝胶过滤及FPLC色谱分离纯化得到中华眼镜蛇蛇毒神经生长因
【机 构】
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650011,昆明,云南省药品检验所;中国科学院昆明动物研究所;中国药品生物制品检定所
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目的:控制中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子产品质量,研究其理化性质及生物学活性的定性和定量.方法:通过离子交换色谱、凝胶过滤及FPLC色谱分离纯化得到中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子,按国家新药审批有关要求对其进行了SDS-PAGE电泳,N端蛋白质序列测定,HPLC色谱分析,UV光谱图谱扫描,并利用PC12细胞培养法和鸡胚背根神经节培养法检测其生物活性.结果:电泳为一条带,亚基分子量为13500,N端蛋白质序列测定后确证为神经生长因子(NGF),HPLC为单峰,相对百分含量为95%以上,279.6nm处呈现出蛋白质样特征吸收峰.生物活性测定为,PCl2细胞培养法灵敏度可达lng/ml,鸡胚背根神经节培养法需30ng/ml的浓度梯度才能在神经节上有所反应.结论:此实验样品为具有较高生物活性的高纯度NGF多肽.
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