血小板生成素基因的克隆及其初步表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yyj55555

【摘要】

：

自４月龄胎肝中提取总ＲＮＡ，经逆转录、多酶链反应（ＰＣＲ）获得了血小板生成素（ＴＰＯ）全基因，长约１０８０ｂｐ。将经限制性内切酶ＮｄｅⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切后的ＴＰＯ基因与ＰＲＳＥＴＡ载体相连接，转化大肠杆菌后得到两个阳性重组质粒ＰＴ４和ＰＴ１０，经核苷酸

【作者】

：

张琰平樊晓翔

【机构】

：

卫生部北京生物制品研究所

【出处】

：

中国生物制品学杂志

【发表日期】

：

1999年1期

【关键词】

：

血小板生成素多聚酶链反应克隆 ThrombopoietinPCRClone

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自４月龄胎肝中提取总ＲＮＡ，经逆转录、多酶链反应（ＰＣＲ）获得了血小板生成素（ＴＰＯ）全基因，长约１０８０ｂｐ。将经限制性内切酶ＮｄｅⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切后的ＴＰＯ基因与ＰＲＳＥＴＡ载体相连接，转化大肠杆菌后得到两个阳性重组质粒ＰＴ４和ＰＴ１０，经核苷酸序列分析证实，所克隆的基因与文献报道一致，将ＰＴ４转染Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９（ＤＥ３），经１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导表达，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，相

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