玉米褪绿斑驳病毒RT-LAMP快速检测方法的建立(英文)

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玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)是我国对外公布的检疫性有害生物,采用逆转录环介导等温扩增技术(Reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),建立了一种快速、灵敏和特异的MCMV检测方法。根据MCMV外壳蛋白基因序列的保守区设计了3组引物,通过特异性试验筛选确定了第二组引物。灵敏度试验显示该方法的灵敏度与RT-PCR方法相当,而检测时间明显缩短,1 h即可完成反应。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。研究组还对玉米种子中携带的玉米褪绿斑驳病毒病毒进行了RT-LAMP检测,结果表明,裸眼判定与仪器监测结果一致。该研究所建立的MCMV RT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏,操作简单的特点,不需复杂仪器设备,适合于MCMV的现场快速检测。
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